重組蛋白均一性試驗(yàn)

2025-07-13 關(guān)鍵詞：重組蛋白均一性試驗(yàn)測(cè)試方法,重組蛋白均一性試驗(yàn)測(cè)試范圍,重組蛋白均一性試驗(yàn)測(cè)試周期相關(guān)：

重組蛋白均一性試驗(yàn)摘要：重組蛋白均一性試驗(yàn)是評(píng)估重組表達(dá)蛋白質(zhì)批次間化學(xué)和物理特性的關(guān)鍵技術(shù)過程,，核心檢測(cè)對(duì)象包括蛋白質(zhì)純度,、分子一致性,、生物活性及結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性,。關(guān)鍵項(xiàng)目涵蓋純度百分比分析、分子量分布測(cè)定,、電荷變異評(píng)估,、聚集狀態(tài)檢測(cè),、糖基化水平分析,、序列完整性驗(yàn)證,、宿主殘留物定量、內(nèi)毒素控制,、生物活性測(cè)定及熱穩(wěn)定性測(cè)試,，確保重組蛋白在治療、診斷和工業(yè)應(yīng)用中符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),。

項(xiàng)目咨詢獲取報(bào)價(jià)

參考周期：常規(guī)試驗(yàn)7-15工作日,，加急試驗(yàn)5個(gè)工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測(cè)試,望諒解(高校,、研究所等性質(zhì)的個(gè)人除外),。

檢測(cè)項(xiàng)目

純度分析檢測(cè)：

色譜純度：純度百分比（≥98%，參照ICHQ6B）
雜質(zhì)檢測(cè)：宿主蛋白殘留量（≤100ppm）,、DNA殘留量（≤10ng/mg）

分子一致性檢測(cè)：

分子量測(cè)定：主峰分子量偏差（±0.5%,，參照USP<621>）
多聚體分析：聚集物占比（≤5%）

電荷變異檢測(cè)：

等電點(diǎn)測(cè)定：pI值范圍（變異系數(shù)≤0.05）
電荷異構(gòu)體分析：堿性/酸性變體比例（≤10%）

生物活性檢測(cè)：

體外活性：EC50值（相對(duì)偏差±20%）
受體結(jié)合能力：結(jié)合常數(shù)（KD≤10nM）

結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性檢測(cè)：

圓二色譜分析：二級(jí)結(jié)構(gòu)一致性（α-螺旋含量±3%）
熱穩(wěn)定性：Tm值（≥65°C）

糖基化分析：

糖型分布：主糖型占比（≥80%）
唾液酸含量：唾液酸化程度（2-4mol/mol）

序列完整性檢測(cè)：

肽圖覆蓋率：序列覆蓋率（≥95%）
序列變異：突變頻率（≤0.1%）

殘留物控制：

內(nèi)毒素水平：內(nèi)毒素單位（≤10EU/mg）
培養(yǎng)基組分：小分子殘留量（≤50ppm）

聚集狀態(tài)檢測(cè)：

動(dòng)態(tài)光散射：粒徑分布（多分散指數(shù)≤0.1）
SEC分析：高聚物含量（≤1%）

穩(wěn)定性測(cè)試：

加速穩(wěn)定性：降解產(chǎn)物（≤2%after3monthsat40°C）
pH穩(wěn)定性：活性保留率（≥90%atpH5-8）

檢測(cè)范圍

1.治療性單克隆抗體：涵蓋IgG1/IgG4亞型,，重點(diǎn)檢測(cè)電荷變異和糖基化水平以確保效價(jià)一致性

2.重組酶制劑：包括溶菌酶到蛋白酶類，側(cè)重活性單位測(cè)定和熱穩(wěn)定性以維持催化效率

3.疫苗抗原蛋白：涉及病毒載體蛋白,，檢測(cè)分子完整性和免疫原性以保障安全性

4.融合蛋白：如Fc融合蛋白,，重點(diǎn)評(píng)估融合點(diǎn)穩(wěn)定性和受體親和力

5.細(xì)胞因子類：例如干擾素和白細(xì)胞介素,，檢測(cè)比活性和雜質(zhì)殘留以控制副作用

6.生長(zhǎng)因子：涵蓋EGF和FGF家族,，側(cè)重生物活性測(cè)定和聚集狀態(tài)以優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用

7.診斷用捕獲蛋白：包括抗原結(jié)合蛋白，重點(diǎn)檢測(cè)特異性和靈敏度相關(guān)參數(shù)

8.研究用重組蛋白：如重組標(biāo)簽蛋白,，檢測(cè)批次間一致性和純度以滿足實(shí)驗(yàn)重復(fù)性

9.工業(yè)用生物催化劑：涉及脂肪酶和淀粉酶,，側(cè)重催化效率測(cè)定和熱穩(wěn)定性

10.生物類似藥原型：與原研藥對(duì)標(biāo)，重點(diǎn)分析結(jié)構(gòu)相似性和功能等效性

檢測(cè)方法

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：

ICHQ6B生物技術(shù)產(chǎn)品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)
USP<129>重組DNA衍生產(chǎn)品的質(zhì)量分析方法
EP2.6.1蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法
ISO10993-1醫(yī)療器械生物相容性評(píng)估
FDAGuidanceforIndustry分析規(guī)程驗(yàn)證

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：

ChP2020三部生物制品通則
GB/T37871-2019重組蛋白質(zhì)量檢測(cè)通用要求
YY/T0681-2019生物制品中蛋白質(zhì)含量測(cè)定
GB/T39161-2020生物制品雜質(zhì)檢測(cè)方法
GB/T39201-2020蛋白質(zhì)藥物穩(wěn)定性研究指南

（方法差異說明：ICH與ChP在純度測(cè)試中色譜條件不同,，ICH要求更高分辨率,；USP與GB/T在活性測(cè)定中使用不同細(xì)胞模型，USP強(qiáng)調(diào)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系,，而GB/T優(yōu)先國(guó)內(nèi)驗(yàn)證模型,；EP與YY/T在殘留物檢測(cè)限設(shè)置上，EP采用更低閾值）